鲎试验法中有关内毒素与热原及内毒素抑制因子的问题
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- 发布时间:2022-08-30 13:36
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【概要描述】目前很多文献中,热原与内毒素为同义词,经常互用。但并不是所有的内毒素均有很强的致热性,因为已经证明某些天然的内毒素致热性较弱、需要较大的剂量(如>2μg/kg)时才能引起发热。
鲎试验法中有关内毒素与热原及内毒素抑制因子的问题
【概要描述】目前很多文献中,热原与内毒素为同义词,经常互用。但并不是所有的内毒素均有很强的致热性,因为已经证明某些天然的内毒素致热性较弱、需要较大的剂量(如>2μg/kg)时才能引起发热。
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一、内毒素与热原的关系问题
目前很多文献中,热原与内毒素为同义词,经常互用。但并不是所有的内毒素均有很强的致热性,因为已经证明某些天然的内毒素致热性较弱、需要较大的剂量(如>2μg/kg)时才能引起发热。反之,亦并不是所有的能引起发热的物质均为内毒素。许多化学物质,特别是中枢作用药如利血平、丙咪嗪、5-羟色胺、胍乙啶在一定条件下亦能致热。各种微生物及其产物、免疫复合物及激素等均可引起发热。而这些发热物质易被热力破坏,故大输液和药品、器械在工业生产过程中容易防止污染而被清除,仅有内毒素难以清除,易造成危害。
二、内毒素抑制因子问题
内毒素抑制因子又称内毒素抑制物质、主要存在于血浆中。血浆中内毒素抑制因子很多,因此内毒素抑制因子并非仅为一种单一的成分,而是由好几种(甚至数十种〉物质组成。内毒素抑制因子与内毒素的作用为一种可逆的反应,并不破坏内毒素,当采取各种方法除去或破坏这些抑制因子后,内毒素的活性可以完全恢复。
目前对内毒素抑制因子的本质尚未完全搞清,一般认为可能有以下几类:
1.蛋白酶类
有人发现血清中的两种α2球蛋白对内毒素有抑制作用。在Ca++存在下,一种耐热的血清酯酶有抗内毒素的作用,另一种不耐热的α-球蛋白可使LPS碎片去毒性。日本学者小林正义从血清中分离到称为E1和E3的内毒素抑制因子,根据其分子量、碳水化-物含量、氨基酸成分,以及应用免疫扩散及免疫电泳技术证明E1即α1 -抗胰蛋白酶(α1 -AT),E3即抗凝血酶Ⅲ(A t-Ⅲ )。继而,用纯化的α1 -AT及At-Ⅲ亦证实其有抑制LT反应的作用。其中的α1 -AT的抑制作用强,At一Ⅲ的抑制作用较弱。但后者在肝素存在时,抑制作用可增强。
2.菌体抗体
亦称O抗体,为内毒素O抗原刺激机体而产生的。动物实验证明,抗体对LT(鲎试验法,Limulus test)反应有抑制作用,抑制机理可能为与内毒素的O抗原结合。O抗体的抑制作用是有型特异性的,与补体无关。其它如胆汁酸盐、药物(EDTA,肝素、青霉素和多粘菌素B等)对LT反应亦有抑制作用。
常用除去血浆抑制因子方法的除去能力如表3所示。
从表3的结果可以看出,上述几种方法均不能完全去除血浆中的抑制因子。今后宜加强这方面的研究。
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本文节选自:《内毒素的检测与鲎实验(三)》,文章作者:余庆。如有侵权,请联系删除,谢谢!
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