从事细菌内毒素检测（BET）的技术人员在日常工作中，肩负着为多样化产品设定精确内毒素限值的重要任务。他们不仅需根据每种产品的特性定制专属检测方法，还需确保这些方法的验证过程严谨无误，最终顺利交接给质量控制部门。

那么，究竟什么是内毒素限值？为了准确计算这一关键指标，技术人员需要了解哪些信息才能计算出内毒素限值？

一、内毒素限值的定义与重要性

内毒素限值，简而言之，是指在产品中允许存在的内毒素最大浓度阈值，这一数值的设定旨在评估内毒素（作为革兰氏阴性细菌外膜外层的成分）在注射到哺乳动物体内后引发不良反应，特别是发热症状。由于革兰氏阴性细菌在自然界中普遍存在，因此大多数原材料和肠外产品中可能都存在一定程度的内毒素。为此，药典BET标准依据产品特异性、剂量依赖性、给药途径和给药时间依赖性的考量，精确计算出内毒素限值，以此作为衡量并控制产品中保留的内毒素水平的关键指标，从而全面评估药品的安全性。

二、内毒素限值的计算方法

计算内毒素限值通常采用公式K/M，其中K为内毒素阈值剂量，M为人用每千克体重每小时的最大供试品剂量。

在细菌内毒素限值公式中，K值作为分子部分，即内毒素阈值剂量（TPD），是一个至关重要的常数。它代表了通过统计评估得出的、能够诱发兔子发热反应所需的内毒素活性水平的临界值。

很多人，甚至一些现行的指导文件都混淆了这一点，认为“K”就是内毒素限值。然而，“K”只是其中的一部分……

总的来说，K值取决于给药途径。对于静脉注射（IV）或肌肉注射（IM）产品，K=5EU/（kg·h）；对于鞘内给药（IT）产品，K值显著降低至0.2EU/（kg·h）。对于放射性药物，则非鞘内给药途径的K=175EU，鞘内给药途径的K=14EU。

M =ml /（kg·h）

M =mg /（kg·h）

M =U/（kg·h）

内毒素限值公式中的分母 “M ”为人用每千克体重每小时的最大供试品剂量，其计算需考虑目标患者群体的体重、给药剂量及给药时间。对于不同患者群体（如成人、儿童或不同动物种类），M值需进行相应调整。

例如：在儿科用药中，某一药品的剂量以ml/（kg·h）为单位进行标示，我们可将其定义为M，作为参考基准。当药品为兽药且适用于多种动物时，则ml/（kg·h）通常是给予最小动物的最高剂量。这虽是基于经验总结的通用原则，但仍需通过计算代表目标患者群体极端情况的多个实例的ml /（kg·h）来确认内毒素限值，以确保用药的安全性与有效性。

三、计算内毒素限值需了解的信息

为了准确计算内毒素限值，技术人员需要掌握以下关键信息：

给药途径：了解产品的给药方式，以确定适用的K值。如；静脉注射（IV）或肌肉注射（IM）给药，K=5EU/kg，鞘内给药K=0.2 EU/kg。

确定每公斤患者的剂量：若剂量最初是以“全人”（即成人平均体重）为基础设定的，则必须用剂量除以目标人群的体重来调整剂量，以计算出剂量/kg的具体值。如果某一药物的整体剂量适用于成人和儿童，那么儿童剂量/（kg·h）将高于成人剂量/（kg·h）。

每小时的剂量：在计算药物剂量时，若总剂量是通过持续“n”小时的输注方式给予，那么为了确定每小时的给药量，则必须通过将总剂量除以给药时间来调整，以获得每小时的剂量。

对于任何给药途径，内毒素限值都与剂量成反比。剂量越低，每单位剂量的限值就越高。如 ：

如果剂量为1 mg/（kg·h），则内毒素限值为5 EU/（kg·h）÷1 mg/（kg·h）=5 EU/mg

如果剂量为10 mg/（kg·h），则内毒素限值为5 EU/（kg·h）÷10 mg/（kg·h）=0.5 EU/mg

如果剂量为100mg/（kg·h），内毒素限值为5 EU/（kg·h）÷100 mg/（kg·h）=0.05 EU/mg

确定一种产品的最低内毒素限值是一个综合性的评估过程，因为它可能因不同的给药途径、剂量/kg（每公斤体重剂量）以及剂量/h（每小时剂量）而有所变化。为了精确找到任何给定制剂的最低内毒素限值，必须全面考虑实验室提供的数据及包装说明书中的详细说明，将所有这些因素综合起来进行计算分析。这一过程确保了最终确定的内毒素限值能够全面反映产品在不同使用条件下的安全性要求。

四、结论

内毒素限值的计算与检测方法的开发是确保药品安全性的重要环节。通过科学合理地设定内毒素限值，并开发灵敏可靠的检测方法，可以有效降低药品中内毒素含量对患者健康的潜在威胁。因此，在医药研发和生产过程中，应高度重视内毒素检测工作，并不断完善相关技术和标准体系。

原文来源：

American Pharmaceutical Review Endotoxin Supplement 2018

Calculating Endotoxin Limits for Drug Products