生物方法消除凝胶法细菌内毒素检查中的干扰因素
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- 来源:
- 发布时间:2024-11-29 15:06
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【概要描述】在凝胶法细菌内毒素检查中,鲎试剂凝集系统的G因子反应旁路是一个重要的干扰因素。该旁路可以被β-葡聚糖激活,导致细菌内毒素检查的“假阳性”结果,从而影响检测的准确性。为了消除这一干扰,生物方法被广泛应用于实践中。
生物方法消除凝胶法细菌内毒素检查中的干扰因素
【概要描述】在凝胶法细菌内毒素检查中,鲎试剂凝集系统的G因子反应旁路是一个重要的干扰因素。该旁路可以被β-葡聚糖激活,导致细菌内毒素检查的“假阳性”结果,从而影响检测的准确性。为了消除这一干扰,生物方法被广泛应用于实践中。
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在凝胶法细菌内毒素检查中,鲎试剂凝集系统的G因子反应旁路是一个重要的干扰因素。该旁路可以被β-葡聚糖激活,导致细菌内毒素检查的“假阳性”结果,从而影响检测的准确性。为了消除这一干扰,生物方法被广泛应用于实践中。
在最新的USP、EP及JP细菌内毒素检查法中,对鲎试剂的使用进行了明确的注释。这些标准指出,除了内毒素外,鲎试剂还会与某些β-葡聚糖发生反应。因此,对于含有β-葡聚糖的样品,必须使用特异性鲎试剂进行检查,以确保结果的准确性。
特异性鲎试剂具有不同的特点,以适应不同的检测需求。其中,无G因子鲎试剂是通过亲和层析方法去除普通鲎试剂中的G因子而制得的。这种试剂即使在被测样品中存在真菌多糖(非内毒素)时,也不能产生活化的G因子,从而阻断了旁路反应,使其对内毒素具有特异性。另一种特异性鲎试剂则采用特殊试剂,只去除抗LPS因子而保留抗G因子,既增加了对内毒素的敏感性,又削弱了真菌多糖活化G因子的能力。
此外,还有一种制备特异性鲎试剂的方法是在普通鲎试剂的基础上加入过量的真菌多糖。这种方法可以阻止G因子的活化,即“封闭”了旁路,从而达到制备特异鲎试剂的目的。例如,复方丹参注射液、清开灵注射液和参麦注射液等药品在细菌内毒素检查中,就通过加入(1-3)-β-D葡聚糖来消除β-葡聚糖的干扰。
为了避免β-葡聚糖的干扰,建议在日常工作中尽量使用特异性鲎试剂代替普通鲎试剂进行含糖大输液及其他大输液的细菌内毒素检查。如果必须使用普通鲎试剂,则应在排除干扰的情况下得出结论。同时,应完善药典中葡萄糖原料的质量标准,将β-葡聚糖的含量控制纳入检测范围,并在生产中尽量使用定点厂家的合格葡萄糖原料。
需要注意的是,不同厂家生产的鲎试剂其特异性可能存在较大差异。因此,在出现内毒素阳性结果时,应谨慎下结论,并在排除葡聚糖干扰后再进行确认,以避免误判。通过合理的选择和使用特异性鲎试剂,可以显著提高细菌内毒素检查的准确性和可靠性。
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