鲎试剂如何正确操作?
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- 来源:
- 发布时间:2022-09-09 09:52
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【概要描述】 内毒素检测结果与鲎溶解物试验的敏感性密切相关,而鲎溶解物试验的敏感性则与正确使用鲎溶解物试验密切相关。因此,必须严格执行鲎试剂的质量标准,规范鲎试剂的使用。
鲎试剂如何正确操作?
【概要描述】 内毒素检测结果与鲎溶解物试验的敏感性密切相关,而鲎溶解物试验的敏感性则与正确使用鲎溶解物试验密切相关。因此,必须严格执行鲎试剂的质量标准,规范鲎试剂的使用。
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内毒素检测结果与鲎溶解物试验的敏感性密切相关,而鲎溶解物试验的敏感性则与正确使用鲎溶解物试验密切相关。因此,必须严格执行鲎试剂的质量标准,规范鲎试剂的使用。
鲎试剂的质量管理主要工作表现于其灵敏度、自凝时间与成胶状态三个发展方面:灵敏度稳定;自凝时间不低于24h;具有中国一定的缓冲技术能力与合适的pH值;反应后即形成一个坚实凝胶,将成胶安瓿翻转180°而不会被破坏。而质量稍差的鲎试剂存放需要一定时间后(如半年)其灵敏度分析可能都没有发生巨大变化,而灵敏度的改变这样会使我们测定研究结果所反映的供试品中内毒素的允许限值发生重大变化。因此,需选择一些具有不同国家政府颁发的批准文号,质量安全稳定的鲎试剂。
由于不同厂家的鲎试剂的质量不同,即使同一厂家不同批号的鲎试剂也会有所不同。这导致鲎试剂的灵敏度复核值与标记值不一致,因此鲎试剂的复核值对检测结果有显著影响。每次使用新批号的TAL试剂时,应检查灵敏度;TAL试剂留样自生产之日起每6个月进行一次灵敏度试验,在有效期内灵敏度应符合要求。一些研究表明,鲎试剂的灵敏度在3年内变化不大,在符合标准和适宜的储存条件下是稳定的。有人建议,可酌情延长其有效性。因此,检验鲎试剂(TLA)的灵敏度,以保证实验的准确性,并尽可能地使用鲎试剂。
在使用鲎溶解物试验试剂时,选择合适的操作方法和顺序是非常重要的。在操作过程中要注意以下几点:
(1)实验室要求清洁、无尘循环;检查人员同时要注意保持卫生。
(2)在开启、溶解及配制鲎溶解物试验时,应避免将异物如灰尘、安瓿壁碎片及砂轮锯屑等混入鲎溶解物试验内,以免鲎溶解物试验受损。
(3)鲎溶解物试验中的蛋白质种类繁多,如果用力摇晃,会产生气泡,影响检测的准确性,因此在整个操作过程中应使用光力,避免因过度震动而造成误差。
(4)取样时,必须把反应物加入接近鲎溶解物试验测试溶液但不接触管壁的试管底部。
(5)严格控制温度和时间。当鲎溶解物试验加入内毒素及样本混合物中时,反应已经开始,在一定温度范围内,反应温度越高,反应速度越快,保存时间越长,鲎试剂的灵敏度越高,并会出现假阳性,从而引致较大的误差。因此,要注意控制温度变化和保温时间。其他经证明不会干扰细菌内毒素测试的适当方法亦可使用。
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