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鲎试剂在细菌内毒素检查法中的正确使用

鲎试剂在细菌内毒素检查法中的正确使用

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  • 发布时间:2022-11-29 10:46
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鲎试剂在细菌内毒素检查法中的正确使用

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内毒素检查法结果准确与否与所用试剂的灵敏度相关性很大试剂的灵敏度与它的正确使用又密切相关。所以一定要严格执行试剂的质量标准规范使用试剂。

 

(一)保证所使用试剂的质量

试剂的质量主要表现在其灵敏度、自凝时间与成胶状态三个方面:灵敏度稳定自凝时间不低于24h具有一定的缓冲能力与合适的pH反应后即形成坚实凝胶将成胶安瓿翻转180°而不会被破坏。而质量稍差的试剂存放一定时间后如半年其灵敏度可能发生变化而灵敏度的改变会使测定结果所反映的供试品中内毒素的允许限值发生变化。因此需选择具有国家颁发的批准文号质量稳定的试剂。

 

试剂灵敏度进行监测性复核

由于不同厂家试剂质量不尽相同即便是相同厂家不同批号的试剂也有差异这便导致试剂灵敏度复核值与标示值不尽一致因此试剂的复核值对检测结果有显著影响。每使用新批号试剂时应复核其灵敏度对留样试剂自生产之日起6个月进行一次灵敏度检测其灵敏度在有效期内应符合规定。有研究表明,鲎试剂的灵敏度在符合标准规定及适当的贮存条件下3年内其灵敏度变化不大是稳定的。建议可适当延长其有效期因此试剂灵敏度进行监测性复核有利于确保实验的准确性同时可以最大程度地使用试剂。

 

使用过程正确操作

选择合适的操作方法与顺序试剂的使用过程中尤为重要。在操作过程中要注意以下几点:

  1. 实验室要求洁净、无尘埃流通检验人员同时注意卫生的保持。在整个使用操作过程中应防止微生物的污染例如空气的流动人员的口沫、汗液污染等。

 

  1. 试剂开启、溶解和配制时应尽量避免将安瓿外瓶壁脏物、瓶壁碎片、砂轮锯屑等异物混入试剂中避免试剂外损。

 

  1. 试剂中含有多种蛋白质用力振摇会产生气泡一旦起泡难以消除而影响检测的准确性所以在整个操作过程中都要轻力以避免因过分震动而引起的误差。

 

  1. 量取和加样反应物时一定要加到试管底部接近试液而不接触试液的管壁处。

 

  1. 生成凝胶的最适pH值为6~-8对于氯化钠注射液、葡萄糖注射液5%10%等注射液不需考虑供试液的pH而检查其他制剂时尤其是一些本身缓冲能力较强或偏酸、碱的供试品应考虑供试品的pH

 

  1. 使用时要严格控制温度和时间。当试剂一加入内毒素及样品混合液中时反应已开始并在一定的温度范围内反应温度越高反应速率越大保温时间的增长也会提高试剂的灵敏度增加假阳性的发生导致较大差。因此要注意控制温度的变化和保温时间。

 

  1. 保持实验器具的洁净。每次检验完毕应及时将玻璃器具允分清洗后于250℃干热灭菌处理待烤箱温度升至设定的温度后开始计时十烤至少1h。也可用其他经确证不十扰细菌内毒素的检查的适宜方法。对于塑料、橡胶等不耐热器材可用30%双氧水浸泡4h用无热原水冲洗70℃干燥备用。

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