使用鲎试剂的注意事项有哪些?
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- 来源:
- 发布时间:2022-12-08 10:22
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【概要描述】 鲎试剂是由海洋节肢动物鲎变形细胞溶解物制成的无菌冻干品,其中含有凝血原和能被微量细菌内毒素和真菌葡聚糖的凝血原,从海洋节肢动物鲎变形细胞溶解物的蓝血中提取,生化试剂低温冻干,它能准确、快速地定性或定量检测样品中是否含有细菌内毒素和(1.3)-β-葡聚糖。
使用鲎试剂的注意事项有哪些?
【概要描述】 鲎试剂是由海洋节肢动物鲎变形细胞溶解物制成的无菌冻干品,其中含有凝血原和能被微量细菌内毒素和真菌葡聚糖的凝血原,从海洋节肢动物鲎变形细胞溶解物的蓝血中提取,生化试剂低温冻干,它能准确、快速地定性或定量检测样品中是否含有细菌内毒素和(1.3)-β-葡聚糖。
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鲎试剂是由海洋节肢动物鲎变形细胞溶解物制成的无菌冻干品,其中含有凝血原和能被微量细菌内毒素和真菌葡聚糖的凝血原,从海洋节肢动物鲎变形细胞溶解物的蓝血中提取,生化试剂低温冻干,它能准确、快速地定性或定量检测样品中是否含有细菌内毒素和(1.3)-β-葡聚糖。
鲎试剂广泛应用于药学、临床和科研领域,用于检测细菌内毒素和真菌葡聚糖,所用的鲎试剂可分为美国鲎试剂和东方鲎试剂,内毒素检测结果的准确性与鲎试剂的灵敏度密切相关,鲎试剂的灵敏度与其正确使用密切相关,因此,必须严格执行鲎试剂的质量标准,规范鲎试剂的使用,确保所用鲎试剂的质量。
在使用鲎试剂的过程中,选择合适的操作方法和顺序尤为重要,操作时注意以下几点:
(1)实验室应清洁无尘;同时,检查人员要注意卫生,在整个操作过程中,应防止微生物污染,如空气流动、人员口腔泡沫、汗液污染等。
(2)鲎试剂在开封、溶解、配制时,应尽可能将安瓿外瓶壁上的污垢、瓶壁碎片、砂轮木屑等异物混入鲎试剂中,以避免鲎试剂受到外界损伤。
(3)鲎变形细胞溶解物含有多种蛋白质,用力摇动会产生气泡,气泡一旦难以除掉,就会影响检测的准确性,所以在整个操作过程中要轻力,避免因振动过大而产生误差。
(4)计量加入反应物时,一定要加入到试管底部鲎试液附近的管壁上,不要接触鲎试液。
(5)凝胶的最适pH值为6~8.对于氯化钠注射液、葡萄糖注射液(5%、10%)等注射液,可不考虑试液的pH值,检查其他制剂时,特别是一些缓冲能力强或偏酸性或偏碱性的供试品,应考虑供试品的pH值。
(6)使用时,严格控制温度和时间。在内毒素和样品的混合溶液中加入鲎试剂,反应开始,在一定温度范围内,反应温度越高,反应速率越大,孵育时间的增加也会提高鲎试剂的灵敏度,增加假阳性的发生,导致更大的误差,因此,应注意控制温度变化和保温时间。
(7)保持实验室设备的清洁,每次检查后,应及时彻底清洗玻璃器皿,然后用250干热灭菌,烤箱温度升至设定温度后,开始计时,干烤至少1小时,也可以使用其他被证实不干扰细菌内毒素检测的合适方法。塑料、橡胶等耐热设备可在30%双氧水中浸泡4h,不加热用生水冲洗,70烘干备用。
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