人类CD14与脂多糖的结合域位于CD14N端的151个氨基酸上，因为含有该序列氨基酸修剪（truncation）的CD14足以引起完全的生物学反应，之后研究者进一步发现，N端的65个氨基酸是CD14结合脂多糖及信号传递的关键区域。为了更精确定位CD14分子的结合位点，研究者采用基因突变等方法，使个别氨基酸的密码子发生变异。

Stelter等在N端的152氨基酸区域内用丙氨酸取代而获得一系列的CD14突变体，23种突变体蛋白质中有21种能稳定地表达在转染的CHO细胞表面，其中20种在血浆中对LBP以依赖性的方式结合脂多糖，只有一种突变体（Ala39-Ala41，Ala43，Ala44）CD14不能与脂多糖或大肠杆菌发生特异性的相互作用，也不能引发由脂多糖启动的NF-eB的核移位，且这种突变体的CD14不与CD14单克隆抗体My4发生反应。抗CD14单克隆抗体My4具有广泛的种属间交叉反应性，与人、牛、猪、兔及豚鼠的单核细胞的CD14均能反应，说明My4只能够识别CD14中非常保守的表位。

上述结果显示，N端39~44残基是人类CD14与脂多糖结合位点的最基本部分。Shapiro等在CD14分子的N端合成有5个氨基酸相互重叠，长度为15个氨基酸的多肽，其中包括含上述区域氨基酸的15肽能够抑制脂多糖与sCD14的结合。