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脂多糖(LPS)的提取与纯化

脂多糖(LPS)的提取与纯化

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  • 发布时间:2023-04-23 14:06
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【概要描述】脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)根据О-特异性侧链的存在与否可分为光滑型(smooth-form,S-LPS)用粗糙型(rough-form,R-LPS)两大类,前者的组成成分有类脂A、核心寡聚糖及О-特异性侧链,而后者仅含有类脂A及完整或部分核心成分。这两类LPS分子在某些物理特征上表现出显著的差异性,主要表现为表观分子量及水溶性方面。

脂多糖(LPS)的提取与纯化

【概要描述】脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)根据О-特异性侧链的存在与否可分为光滑型(smooth-form,S-LPS)用粗糙型(rough-form,R-LPS)两大类,前者的组成成分有类脂A、核心寡聚糖及О-特异性侧链,而后者仅含有类脂A及完整或部分核心成分。这两类LPS分子在某些物理特征上表现出显著的差异性,主要表现为表观分子量及水溶性方面。

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脂多糖(lipopolysaccharideLPS)根据О-特异性侧链的存在与否可分为光滑型smooth-formS-LPS用粗糙型rough-formR-LPS两大类前者的组成成分有类脂A、核心寡聚糖及О-特异性侧链而后者仅含有类脂A及完整或部分核心成分。这两类LPS分子在某些物理特征上表现出显著的差异性主要表现为表观分子量及水溶性方面。

脂多糖(LPS)的提取与纯化

纯度对于研究LPS的物理、化学及生物学特性是至关重要的因为细菌其他成分的污染可影响LPS的物理特性及生物学活性。LPS制剂中最常见的污染物质是核酸、蛋白质及多聚糖这类污染物质存在的量取决于LPS的提取和纯化方法。

70年代以前提取LPS最常用的方法为Westphal等于1952年介绍的酚水法phenol waterPW),用这一方法提取的LPS纯度较高。污染蛋白质含量仅为13%而在此以前所应用的方法如三氯醋酸法超声波法、正丁醇提取法等所提取得到的LPS蛋白污染量可超过10%因而PW方法是一种较为有效的方法。

1969Galanos 等介绍苯酚-氯仿-石油醚phenol-chloro-form-petroleum etherPCP法后LPS的纯度又得到了显著的提高。一方面PW法提取得到的S-LPS可以PCP法纯化另一方面R-LPS由于脂溶性成分的含量较高因而可直接应用PCP法进行提取与纯化。PCP法可去除LPS中常见的污染物质。最终得到的纯化LPS不含核酸及多聚糖蛋白含量亦可控制在1%以下。

LPS中存在的另一类污染物质为无机金属离子及小分子量多胺成分它们的存在可影响LPS的物理性状及生物学活性。应用电透析可将这类成分除去。

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