新闻中心
科德角国际新闻中心
当前位置:
首页
>
>
正文

鲎试剂法检查细菌内毒素应注意的问题

  • 分类:新闻资讯
  • 作者:岳丽娜
  • 来源:
  • 发布时间:2022-07-11 10:40
  • 访问量:

【概要描述】为了保证检查细菌内毒素结果的准确性,用于实验的鲎试剂应首先核对灵敏度。

鲎试剂法检查细菌内毒素应注意的问题

【概要描述】为了保证检查细菌内毒素结果的准确性,用于实验的鲎试剂应首先核对灵敏度。

  • 分类:新闻资讯
  • 作者:岳丽娜
  • 来源:
  • 发布时间:2022-07-11 10:40
  • 访问量:
详情

一、试剂灵敏度的复核

为了保证检查细菌内毒素结果的准确性,用于实验的试剂应首先核对灵敏度。因为实际工作中,发现试剂均符合药典规定标准前提下,由于生产厂家不同,部分试剂的实测灵敏度与标示值有差异而导致检测同一检品时,用相同标示值的试剂,出现不同结果。试剂灵敏度的复核是使用该试剂的前提。中国药典(2000)在灵敏度复核项下规定,只有当实测值λc0.5λ~2.0λ(包括0.5λ和2.0λ)时,方可用于细菌内毒素检查,并以λ为该批试剂的灵敏度,同时要求所用试剂的灵敏度须小于供试品的内毒素限值,因此灵敏度的准确与否直接关系到判断结果的正误,应尽量选用测定值与标示值一致(λc =λb)试剂。有报道,用符合药典规定的灵敏度标示值相同的试剂检测同一检品,结果因试剂实测值与标示值间存在差异而出现了两种完全不同的结果。因而先核对灵敏度可避免因试剂本身造成的判断失误。

 

鲎试剂法检查细菌内毒素应注意的问题

 

二、供试品的稀释

在取样品时,要熟悉中国药典的内容,不能直接取大输液原液0.1ml进行检查,这是排除干扰因素的简单有效的方法。因药典已明确规定实验中鲎试剂的灵敏度不超过0.5EU/ml,根据供试品的稀释公式:

 

供试品稀释倍数=L/λ

 

L:供试品的内毒素限量

 

λ:试剂灵敏度的标示值(EU/ml)

 

故检测大输液均应稀释后才能进行实验,如选用更高灵敏度的试剂,则应增加样品的稀释倍数。稀释用的细菌内毒素检查用水药典作了规定。在4h内不得与试剂产生凝集反应。如果直接用供试品原液实验,就会使供试品的内毒素要求提高到0.5EU/ml0.5EU/ml 以下,这样,根据目前大输液的生产和贮藏条件,有些就会达不到,法检出的阳性率会提高,兔法复核的机遇也将增多,势必会浪费人力物力。

 

以前细菌内毒素的限值是按照热原检查法所需的家兔剂量计算的,由于家兔剂量往往高于人用最大剂量的几倍甚至几十倍,势必造成对产品内毒素要求过于严格,使很多合格产品被判为不合格产品或使药品生产成本增加,所以在USPEP中,相继采用人用最大剂量来计算药品细菌内毒素的限值。如注射用头孢噻肟钠按中国药典(1995)规定的热原剂量计算其细菌内毒素限值,与USP的限值要求相差4倍,而用最大剂量计算则两者十分接近。

 

鲎试剂法检查细菌内毒素应注意的问题

 

三、混合液的pH

供试液与益试剂混合液的pH值对实验的影响较大,根据国内外资料的报道,实验的最适pH6.25~7.25才能形成最佳凝胶试剂本身具有一定的缓冲能力。但pH值过大或过小均可抑制试剂与细菌内毒素的反应,其原因可能是pH值过大或过小均可破坏极微量的内毒素。

四、保温温度

温度对试剂的灵敏度影响很大,保温温度在25~40℃之间,随着温度的升高,试剂的灵敏度亦增大,在40~46℃之间,温度对益试剂的灵敏度无明显影响,达到49℃或更高温度时,则会破坏试剂。故应严格按照药典的要求,温度控制在(371)℃之间,才可获得理想的结果。

五、振动的影响

试剂与细菌内毒素形成的凝胶受到振动后易变形而误判为阴性。因此,在实验过程中,不宜进行容易引起试管振动的实验操作,实验用的试管架的眼孔直径应与安瓿或试管直径相接近,避安瓿或试管左右晃动。水浴箱要放置在固定不易受到振动的地方,保温过程中不可随时取出观察。

 

鲎试剂法检查细菌内毒素应注意的问题

 

六、所用器皿的影响

所用器皿均应彻底洗净和灭菌,实验用器皿均应充分洗涤并冲洗干净,特别是接触酸碱或用洗衣粉、洗液等洗涤后,更应冲洗干净,以免残留物破坏极微量的内毒素。灭菌应按药典中的有关方法处理,防止引入外源性内毒素。如有条件的话可用合格的细菌内毒素快检盒。

 

 

免责声明:

本文节选自:《细菌内毒素检测中问题的研究》,文章作者:岳丽娜。如有侵权,请联系删除,谢谢!

 

关键词:

扫二维码用手机看

资讯推荐

产品推荐

细菌内毒素&葡聚糖检测分析软件_Pyros®eXpress
细菌内毒素&葡聚糖检测分析软件_Pyros®eXpress
Pyros® eXpress 软件支持 ACC 的所有定量内毒素和葡聚糖检测分析,并允许用户在质量控制环境中快速有效地进行测试。
细菌内毒素检测仪_PKF32
细菌内毒素检测仪_PKF32
Pyros Kinetix® Flex是一款新型细菌内毒素检测仪,适用于基因重组法/动态显色法/动态浊度法内毒素检测及葡聚糖试剂盒检测实验,仪器包括32, 64, 96孔三种型号,符合USP,EP,JP细菌内毒素检测标准。
细菌内毒素定量检测系统_PKF96
细菌内毒素定量检测系统_PKF96
Pyros Kinetix® Flex是一款新型细菌内毒素定量检测系统,适用于基因重组法/动态显色法/动态浊度法内毒素检测及葡聚糖试剂盒检测实验,仪器包括32, 64, 96孔三种型号,符合USP,EP,JP细菌内毒素检测标准。
基因重组鲎试剂_PNG050-2
基因重组鲎试剂_PNG050-2
PyroSmart NextGenTM(PSNG)基因重组鲎试剂是一种基因工程合成的细菌内毒素定量检测试剂,不依赖天然鲎血,满足可持续发展的目标,可以应用动态显色法进行测试和分析。
显色法鲎试剂_CG1500
显色法鲎试剂_CG1500
细菌内毒素检测显色法试剂盒是一款多功能高灵敏度的细菌内毒素检测试剂,可用于动态显色法检测和终点显色法检测

底部联系方式信息(左)

发布时间:2022-01-27 11:34:07

400-687-1881

公司电话:010-87875910

公司邮箱:info@bio-life.cn

公司官网:www.acciusa.cn   www.bio-life.cn

公司地址:北京市大兴区中关村科技园区大兴生物医药产业基地

华佗路50号院18幢

这是描述信息

关注官方微信

这是描述信息

关注手机网站