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细菌内毒素检测的常用方法

细菌内毒素检测的常用方法

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  • 发布时间:2023-06-01 12:00
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【概要描述】细菌内毒素检测是医药行业用于检测药物和医疗器械中内毒素含量的常用方法,主要有以下几种

细菌内毒素检测的常用方法

【概要描述】细菌内毒素检测是医药行业用于检测药物和医疗器械中内毒素含量的常用方法,主要有以下几种

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  细菌内毒素检测是医药行业用于检测药物和医疗器械中内毒素含量的常用方法,主要有以下几种:

  1. 色谱-凝胶法:用凝胶平板对样品进行色谱分离,然后利用鲎试剂(LAL)试剂检测每一分离区中的内毒素,最终通过比色法测定内毒素活性,并计算总内毒素量。该法灵敏度高但操作繁琐。

  2. 酶联免疫吸附试验(ELISA):使用抗内毒素抗体包被的微孔板吸附样品中的内毒素,然后再使用酶标记的抗体和底物显色,通过吸光度测量其活性,定量计算内毒素量。该法灵敏度较高,可以检测很低剂量的内毒素。

  3. 髓鞘细胞溶血反应(LAL)法:利用内毒素可以活化马蝗血蓝蛉(LAL)中的酶,产生裂解核糖核苷酸聚合物,继而破裂红细胞的性质,通过测定释放的血红蛋白来定量内毒素的活性和量。该法操作简单快速,灵敏度达0.01EU/ml。

  4. 生物发光法(Bacterial Endotoxins Test,BET):利用内毒素可以激活炭疽杆菌或海洋发光菌产生生物发光的反应,通过检测发光信号来定量内毒素的活性和含量。该法自动化程度高,灵敏度高达0.005EU/ml。

  5. 定量凝固法:借助血液凝集反应测定内毒素量。血浆与样品中的内毒素发生凝集反应,反应时间与内毒素浓度成正比,通过测定凝集时间计算内毒素量。该法简单快速但灵敏度较低。

  以上方法各有优缺点,在实际检测中通常选用两种或以上方法进行细菌内毒素检测,以提高准确性。

  未来,随着生物技术和仪器分析技术的发展,新方法将逐步应用于内毒素检测领域,如增加自动化、提高灵敏度与特异性。内毒素检测技术的进步为药品和医疗器械的质量控制提供了重要保障。

 

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