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生物制品中内毒素祛除方法的选择原则

  • 分类:新闻资讯
  • 作者:程春雷
  • 来源:
  • 发布时间:2022-07-19 09:59
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【概要描述】生物制品中内毒素祛除方法应根据蛋白的生产工艺来选择。因为每种蛋白的生产工艺不同,所以没有通用的祛除蛋白质内毒素的方法。

生物制品中内毒素祛除方法的选择原则

【概要描述】生物制品中内毒素祛除方法应根据蛋白的生产工艺来选择。因为每种蛋白的生产工艺不同,所以没有通用的祛除蛋白质内毒素的方法。

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生物制品中内毒素祛除方法应根据蛋白的生产工艺来选择因为每种蛋白的生产工艺不同所以没有通用的祛除蛋白质内毒素的方法如阴离子交换柱常用来去除正电荷蛋白的污染比如尿激酶等[1]然而对于一些带负电荷的蛋白产品来说则应选用其他方法因为这种方法会有吸附作用使产品丢失对于一些小分子蛋白比如肌红蛋白(相对分子质量18000)可采用超滤法但效率不高而且如果内毒素与蛋白相互作用会引起内毒素单体被膜吸附使超滤法亦不能采用

 

因为内毒素对热和pH变化不敏感因此在蛋白纯化的下游工艺中内毒素的祛除成为非常重要的技术之一如果是易变的生物分子如蛋白质等内毒素的祛除更具有挑战性在蛋白质制备过程中有许多方法可以选用包括离子交换色谱﹑硅胶吸附色谱固定组氨酸、多聚-L-赖氨酸、多粘菌素B等的亲和吸附法凝胶过滤色谱﹑超滤﹑蔗糖梯度离心、Tritonx-114相分离等应根据目的蛋白的特性来选择从蛋白中分离祛除脂多糖的方法无论选择何种方法2种非常重要的因素影响其成功一是内毒素与蛋白抗原复合物对色谱介质的亲和力另一是内毒素对蛋白抗原的亲和力此外内毒素与结合蛋白的亲和力还要受浓度﹑pH值清洁剂溶剂和变性剂等方面的影响

 

生物制品中内毒素祛除方法的选择原则

 

通常内毒素的祛除方法往往在选择性﹑吸附能力和蛋白回收率方面还存在不少的问题在不含蛋白质的溶液中根据内毒素和溶液的分子大小采用不同孔径大小进行超滤或者是采用疏水性非选择性吸附或离子交换可轻松选择祛除内毒素对于在含蛋白的溶液中选择性祛除内毒素必须要了解内毒素在溶液中的存在形式

 

Hiragama[2]认为内毒素聚集物通过其类脂A磷酸集团形成头部成为一负电荷的大分子此特征充分说明在阳离子吸附剂和内毒素磷酸基团结合过程中离子间相互作用扮演了重要角色当在蛋白溶液中选用疏水性吸附剂时表明同样存在吸附剂与内毒素脂质基团的疏水结合这些结合力取决于蛋白的特点净电荷﹑疏水性以及溶液的条件(pH和离子强度等)。

 

参考文献:

[1] 中华人民共和国卫生部.中药新药临床研究指导原则[S].1.1993:207-208.

[2] 南登.康复医学[M].2.北京:人民卫生出版社,2001:244.

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本文节选自:《生物制品内毒素的祛除方法研究进展》,文章作者:程春雷高天勤。如有侵权,请联系删除,谢谢!

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发布时间:2022-01-27 11:34:07

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