我们了解到，鲎血液中含有一种细胞即变形细胞，这种细胞内的溶解物（裂解物tachypleus lysate，TL）可与微量细菌内毒素起凝集反应，这是由TL中的一种酶被细菌（革兰阴性菌）细胞壁成分——脂多糖激活，使其蛋白质形成凝胶所致。为此人们已阐明了这方面的理论机制，并已着手利用各种技术从自然界存在的某些物质中把它提取出来，实践并应用于社会，鲎变形细胞内的溶解物主要有两种，凝固蛋白原及凝固蛋白酶原。这两种物质提取后，即为检测内毒素的益试剂，它的检测灵敏度高低取决于制备擞血细胞溶解物的质量。因此，在制备提取过程中不能有微量的内毒素进入，所以，鲎试剂的制备提取过程是有相当难度的。

一、材料与制备

1、鲎

采用我国东南沿海地区的鲎即东方鲎（中国鲎），采血量最多为400ml，平均200ml（需根据体重大小而定），其变形细胞数最高为5×10¹¹/L以上，平均为4×10¹⁰/L。

2、器材及处理

准备采血瓶（250ml玻璃瓶）注射器等用具，经洗涤后放在重铬酸钾与硫酸的清洁液中浸泡过夜，然后用无内毒素的流水冲洗3次，晾干后于260℃烤箱内烘干3h备用。采血针、管均需用一次性无菌采血器（均无内毒素）。

3、试剂配制

以下试剂中凡是固体试剂均需预先去除内毒素，去内毒素的方法要视各种试剂的耐热度而定，一般用80~120℃不间断烘烤约10h左右。配制试剂用的重蒸馏水应不含内毒素（小于0.03EU/ml内毒素含量）。

1. 抗凝剂1：茶碱（theophylline）2g；磷酸氢二钠（Na₂HPO₄·12H₂O）2g；氯化钠40g；无内毒素蒸馏水1000ml。
2. 抗凝剂2：茶碱0.36g；磷酸氢二钠2g；氯化钠4g；无内毒素蒸馏水1000ml。

（3）洗涤液：磷酸氢二钠2g；氯化钠40g；无内毒素蒸馏水1000ml。

（4）裂解液：将0.05mol/L的三羟甲基氨基甲烷（Tris）用盐酸调节至pH值为7左右，也可加入二价阳离子如Ca²⁺、Mg²⁺、Mn²⁺等提高灵敏度。