LPS微胶粒的解聚方式
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- 发布时间:2024-01-09 13:43
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【概要描述】LPS(lipopolysaccharide,脂多糖)的集聚程度对于其生物学活性有非常显著的影响。在测定LPS的活性时,必须以LPS溶解状态为前提。在水溶液中形成的LPS微胶粒,由于其主要活性部位(Lipid A)不暴露于水溶液中,因此必须采用一系列的方法使LPS多聚体解聚。
LPS微胶粒的解聚方式
【概要描述】LPS(lipopolysaccharide,脂多糖)的集聚程度对于其生物学活性有非常显著的影响。在测定LPS的活性时,必须以LPS溶解状态为前提。在水溶液中形成的LPS微胶粒,由于其主要活性部位(Lipid A)不暴露于水溶液中,因此必须采用一系列的方法使LPS多聚体解聚。
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LPS(lipopolysaccharide,脂多糖)的集聚程度对于其生物学活性有非常显著的影响。在测定LPS的活性时,必须以LPS溶解状态为前提。在水溶液中形成的LPS微胶粒,由于其主要活性部位(Lipid A)不暴露于水溶液中,因此必须采用一系列的方法使LPS多聚体解聚。
对于某种特定的LPS,由于集聚程度的不同,生物学活性可强弱不一。低集聚度的LPS分子表现较强的毒性。相反,高集聚状态的LPS多聚体,由于易被细胞吞噬清除,表现出较低的毒性。不同方法提取的LPS毒性强弱不等,酸法提取的LPS,由于部分α-糖苷键被酸裂解,形成较多游离的LipidA,因此,酸法抽提的LPS毒性较酚法提取的低。LPS的其他生物学活性,如致有丝分裂反应及鲎试剂凝集反应等活性,也受到LPS集聚程度的影响,聚合状态的LPS不能与鲎试剂发生凝集反应,必须通过各种方法将其解聚,变为LPS单体才能使鲎试剂凝集。
在LPS标准品溶解时,往往不能确定其微胶粒状态是否被完全解聚,用旋涡振荡器一般达不到完全解聚的目的。如有条件可用20kHz左右的声波对LPS微胶粒进行解聚,通过此种方法可得到均匀分布的LPS单体溶液,但此种单体分子在溶液中仅能维持约10min左右。
脱氧胆酸(DOC)、十二烷基硫酸钠( SDS)、三硝基甲苯( Triton X-100)等酸性及中性表面活性剂,通过疏水基团与LPS的Lipid A结合,能使LPS微胶粒解离成LPS单体。不同的LPS由于构成组分的差异﹐表面活性剂对其解聚程度也有差异。
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