内毒素的纯化方法有哪些?
- 分类:新闻资讯
- 作者:
- 来源:
- 发布时间:2024-01-11 13:39
- 访问量:
【概要描述】由于提取的LPS中含有较多带正电荷的杂质,因此在LPS的电透析过程中可发现阴极的pH值升高,阳极的pH值变化不明显的现象。电透析过程中LPS溶液的pH值常有一定程度的下降,同时由于有稳定LPS多聚体功能的Mg2+ 、Ca2+等离子成分被除去,LPS多聚体变为单体而发生沉淀。
内毒素的纯化方法有哪些?
【概要描述】由于提取的LPS中含有较多带正电荷的杂质,因此在LPS的电透析过程中可发现阴极的pH值升高,阳极的pH值变化不明显的现象。电透析过程中LPS溶液的pH值常有一定程度的下降,同时由于有稳定LPS多聚体功能的Mg2+ 、Ca2+等离子成分被除去,LPS多聚体变为单体而发生沉淀。
- 分类:新闻资讯
- 作者:
- 来源:
- 发布时间:2024-01-11 13:39
- 访问量:
(一)离子交换层析法
利用阳离子树脂非特异性的吸附带负电荷LPS的性质,将LPS从流动相中分离纯化出来。
(二)亲和层析法
利用多粘菌素B特异性结合LPS的特性,将多粘菌素B包被于聚丙烯胺树脂等高分子聚合物的表面,制成特异性结合LPS的层析柱,即可对LPS进行亲和层析法纯化。
(三)金属离子和小分子量多胺成分的去除
通常情况下,未提纯的LPS溶液中存在大量的小分子带电物质,如Mg2+ 、Ca2+和少量的Fe2+ 、A13+、Zn2+、Na+等离子及乙醇胺、腐胺﹑精胺、亚精胺及尸胺等小分子量多胺。它们中和LPS分子上带负电荷的磷酸基团,使得本可以用带电荷的吸附剂将LPS除去的效果明显降低。电透析便是通过离子交换的方法进行LPS纯化的。其原理就是将很多的阴/阳离子交换膜交错地串联在一起,电解质溶液则在膜间流动,两侧施加直流电之后溶液中阳离子(如无机阳离子、生物碱等)向阴极移动而阴离子(如无机阴离子、有机酸等)向阳极移动。其中阴离子可顺利通过阴离子膜,但再往前移动时却被邻近的阳离子膜挡住。同样,阳离子也可以顺利地通过阳离子膜而无法通过阴离子膜。中性化合物及高分子化合物则留在透析液中,最终得到纯化的提取物(图2-6)。
由于提取的LPS中含有较多带正电荷的杂质,因此在LPS的电透析过程中可发现阴极的pH值升高,阳极的pH值变化不明显的现象。电透析过程中LPS溶液的pH值常有一定程度的下降,同时由于有稳定LPS多聚体功能的Mg2+ 、Ca2+等离子成分被除去,LPS多聚体变为单体而发生沉淀。为避免此现象,需用NaOH或三乙胺将其中和到pH 7.0左右,使其形成中性的、高水溶性的LPS钠盐和LPS三乙胺盐而重新溶解。电透析结束时,LPS一般为酸性产物,此酸性LPS在水中的溶解度极低,可直接进行冻干处理,-4~-20℃低温保存,每次使用前可用不同的碱中和转化成所需要的LPS盐。
(四)核酸成分的去除
根据LPS与核酸片段在分子量上的差异,可用超速离心法、电泳法等方法将其去除。
扫二维码用手机看
产品推荐
底部联系方式信息(左)
400-687-1881
公司电话:010-87875910
投诉热线:400-687-1881转8031
紧急联系:13520563960
公司邮箱:info@bio-life.cn
公司官网:www.acciusa.cn www.bio-life.cn
公司地址:北京市大兴区中关村科技园区大兴生物
医药产业基地华佗路50号院18幢(中国药谷CBP)
关注官方微信
关注手机网站