光度测定法分为浊度法和显色基质法。

一、浊度法：

• 浊度法通过检测反应体系中由于内毒素与鲎试剂反应而产生的浊度变化来间接测定内毒素含量。浊度的增加通常与内毒素的浓度成正比。
• 终点浊度法：在设定的孵育时间后，测量反应混合物的浊度（通常使用吸光度或透光率来表示）。通过已知的标准曲线，可以将测得的浊度值转换为内毒素的浓度。
• 动态浊度法：实时监测反应混合物的浊度变化，并记录达到预设浊度阈值所需的时间（称为浊度时间）。浊度时间越短，表示内毒素浓度越高。

二、显色基质法：

• 显色基质法基于内毒素与鲎试剂反应过程中产生的凝固酶能够催化特定底物分解并释放出呈色团。通过测量呈色团的量来间接测定内毒素含量。
• 终点显色法：在设定的孵育时间后，测量反应混合物中呈色团的量（通常使用吸光度来表示）。与终点浊度法类似，通过已知的标准曲线将吸光度值转换为内毒素的浓度。
• 动态显色法：实时监测反应混合物的吸光度变化，并记录达到预设吸光度阈值所需的时间或吸光度的增加速度。同样，这些参数与内毒素浓度相关。

三、试验条件：

• 光度测定试验应在恒定的温度（通常为37℃±1℃）下进行，以确保反应的稳定性和可重复性。
• 加样量、试剂比例和保温时间等参数应根据所使用的仪器和试剂的说明进行调整。
• 在进行正式试验之前，应进行标准曲线的可靠性试验和供试品的干扰试验，以确保试验结果的准确性和可靠性。

这些光度测定法为内毒素的检测提供了敏感、快速和准确的方法，对于确保医药和生物制品的安全性至关重要。