生物制品中内毒素祛除策略的优化与选择
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- 来源:
- 发布时间:2024-05-27 13:19
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【概要描述】祛除生物制品中的内毒素是一个复杂且需要精细操作的过程,需要根据目的蛋白的特性、溶液条件以及内毒素的存在形式来选择合适的祛除方法。
生物制品中内毒素祛除策略的优化与选择
【概要描述】祛除生物制品中的内毒素是一个复杂且需要精细操作的过程,需要根据目的蛋白的特性、溶液条件以及内毒素的存在形式来选择合适的祛除方法。
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一、内毒素祛除的重要性
原因:内毒素对热和pH变化不敏感,因此在蛋白纯化的下游工艺中,内毒素的祛除成为非常重要的技术之一。
二、祛除方法的选择
根据蛋白特性:由于每种蛋白的生产工艺不同,没有通用的祛除蛋白质内毒素的方法。
离子交换色谱:如阴离子交换柱用于去除正电荷蛋白的污染。
超滤法:适用于小分子蛋白,但效率不高,且内毒素与蛋白相互作用时不可用。
其他方法:硅胶吸附色谱、亲和吸附法(如固定组氨酸、多聚-L-赖氨酸、多粘菌素B等)、凝胶过滤色谱、蔗糖梯度离心、Tritonx-114相分离等。
三、影响因素
内毒素与蛋白抗原复合物的亲和力:影响祛除效果。
内毒素对蛋白抗原的亲和力:同样影响祛除效果。
其他因素:浓度、pH值、清洁剂溶剂和变性剂等。
四、内毒素在溶液中的存在形式
内毒素聚集物:通过其类脂A磷酸集团形成头部,成为一负电荷的大分子。
离子间相互作用:在阳离子吸附剂和内毒素磷酸基团结合过程中起重要作用。
疏水结合:当使用疏水性吸附剂时,吸附剂与内毒素脂质基团之间存在疏水结合。
五、祛除方法的挑战
选择性、吸附能力和蛋白回收率:在含蛋白的溶液中选择性祛除内毒素时,这些方法往往面临挑战。
六、结论
祛除生物制品中的内毒素是一个复杂且需要精细操作的过程,需要根据目的蛋白的特性、溶液条件以及内毒素的存在形式来选择合适的祛除方法。
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